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上海晶抗生物雞ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理介紹
更新時(shí)間:2026-02-02   點(diǎn)擊次數(shù):74次

上海晶抗生物雞ELISA試劑盒,核心是酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定,專門針對(duì)雞源生物樣本(血清、血漿、組織勻漿、卵清、細(xì)胞上清等),定量檢測(cè)雞體內(nèi)的細(xì)胞因子、激素、抗體、病原抗原、營養(yǎng)指標(biāo)、藥物殘留等靶標(biāo)分子,原理與通用 ELISA 一致,但包被抗原 / 抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、種屬特異性二抗均為雞種屬特異性,避免與其他物種交叉反應(yīng),保證檢測(cè)精準(zhǔn)。

上海晶抗生物雞ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理介紹

下面從核心原理、四大經(jīng)典方法原理、實(shí)驗(yàn)通用流程、雞試劑盒專屬特點(diǎn)完整講解,通俗易懂,適配實(shí)驗(yàn)實(shí)操理解。

一、ELISA核心總原理

ELISA 的本質(zhì)是抗原 - 抗體特異性結(jié)合 + 酶催化底物顯色的信號(hào)放大,兩大核心不可分割:

免疫特異性:抗原與對(duì)應(yīng)抗體只發(fā)生一對(duì)一的特異性結(jié)合,如同鑰匙配鎖,雞源靶標(biāo)只會(huì)與試劑盒內(nèi)的雞特異性識(shí)別分子結(jié)合,非目標(biāo)物質(zhì)不結(jié)合、不干擾。

酶促信號(hào)放大:結(jié)合的免疫復(fù)合物上標(biāo)記辣根過氧化物酶(HRP) 或堿性磷酸酶(AP),酶能催化無色底物快速生成有色產(chǎn)物,產(chǎn)物顏色深淺與樣本中靶標(biāo)分子的含量成正比,通過酶標(biāo)儀測(cè)吸光度(OD 值),對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣本中靶標(biāo)的精確濃度。

簡(jiǎn)單總結(jié):靶標(biāo)越多 → 結(jié)合的酶標(biāo)物越多 → 顯色越深 → OD 值越高 → 定量結(jié)果越高。

二、雞 ELISA 試劑盒的 4 種方法原理

雞 ELISA 根據(jù)檢測(cè)靶標(biāo)不同,分為測(cè)抗體、測(cè)抗原、小分子、大分子四類,對(duì)應(yīng) 4 種經(jīng)典方法,也是市面上雞試劑盒主流類型:

1. 間接 ELISA(:檢測(cè)雞源抗體)

適用靶標(biāo):雞抗體、雞新城疫抗體、雞傳染性法氏囊抗體、雞減蛋綜合征抗體、雞支原體抗體等禽病特異性抗體,用于免疫效果評(píng)價(jià)、疫病篩查。

實(shí)驗(yàn)原理流程:

包被:微孔板預(yù)包被雞特定病原的純化抗原(如新城疫病毒抗原),固相化在孔底。

加樣:加入待檢雞樣本(血清),樣本中的雞特異性抗體與包被抗原結(jié)合。

加酶標(biāo)二抗:加入酶標(biāo)記的抗雞 IgG 二抗(種屬核心,只識(shí)別雞 IgG,不識(shí)別鴨、鵝、哺乳動(dòng)物抗體),二抗與結(jié)合在抗原上的雞抗體結(jié)合。

加底物顯色:酶催化底物顯色,終止液終止反應(yīng),測(cè) OD 值。

定量:OD 值越高,說明雞體內(nèi)針對(duì)該病原的抗體含量越高。

2. 雙抗體夾心法(:檢測(cè)雞源大分子抗原 / 蛋白)

適用靶標(biāo):雞白介素 (IL-1β、IL-6)、雞腫瘤壞死因子 (TNF-α)、雞生長(zhǎng)激素、雞胰島素、雞卵清蛋白、雞傳染性支氣管炎病毒抗原等大分子蛋白、細(xì)胞因子、病原抗原。

實(shí)驗(yàn)原理流程:

包被:微孔板預(yù)包被雞靶標(biāo)蛋白的捕獲抗體(單抗 / 多抗,雞種屬特異)。

加樣:加入雞樣本,樣本中的靶標(biāo)抗原與捕獲抗體特異性結(jié)合。

加酶標(biāo)檢測(cè)抗體:加入酶標(biāo)記的雞靶標(biāo)檢測(cè)抗體,與抗原的另一位點(diǎn)結(jié)合,形成捕獲抗體 - 靶標(biāo)抗原 - 酶標(biāo)檢測(cè)抗體的 “三明治" 復(fù)合物。

底物顯色、測(cè)值:顯色深淺與抗原濃度正相關(guān),計(jì)算樣本抗原含量。

核心特點(diǎn):只能測(cè)分子量≥10kDa 的大分子,小分子(激素、藥物殘留)無法用此法,因?yàn)樾》肿又挥幸粋€(gè)結(jié)合位點(diǎn),無法形成夾心結(jié)構(gòu)。

3. 競(jìng)爭(zhēng)法(專用:檢測(cè)雞源小分子物質(zhì))

適用靶標(biāo):雞雌二醇、睪酮、孕酮、甲狀腺激素、磺胺類藥物殘留等小分子激素、獸藥、真菌毒素。

實(shí)驗(yàn)原理流程(兩種形式,試劑盒常用酶標(biāo)抗原 / 酶標(biāo)抗體競(jìng)爭(zhēng)):

包被:微孔板包被雞小分子靶標(biāo)的特異性抗體。

加樣 + 加酶標(biāo)抗原:待檢雞樣本中的游離小分子抗原,與酶標(biāo)記的小分子抗原,競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合孔底的有限抗體位點(diǎn)。

結(jié)合規(guī)律:樣本中游離小分子越多,占據(jù)的抗體位點(diǎn)越多,酶標(biāo)抗原能結(jié)合的位點(diǎn)就越少 → 顯色越淺。

定量:OD 值與靶標(biāo)濃度成反比,顏色越淡,樣本中小分子含量越高。

4. 捕獲法(專用:檢測(cè)雞 IgM 類早期抗體)

適用靶標(biāo):雞疫病早期感染 IgM 抗體(IgM 是機(jī)體感染后出現(xiàn)的抗體,用于早期快速診斷)。

上海晶抗生物以誠信為本,努力打造的品牌,為您提供的雞ELISA試劑盒售中、售前、售后服務(wù),具有的技術(shù)團(tuán)隊(duì),把產(chǎn)品引入國內(nèi)市場(chǎng),滿足國內(nèi)廣大客戶的需求,在二十一世紀(jì)生命科學(xué)蓬勃發(fā)展的時(shí)代,將緊跟生命科學(xué)的發(fā)展動(dòng)態(tài),為廣大科研學(xué)者探索生命的奧秘而奉獻(xiàn)綿薄之力!

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