做完ELISA試劑盒試劑實(shí)驗(yàn)，測完吸光度，數(shù)據(jù)怎么處理？標(biāo)準(zhǔn)曲線不是直線怎么辦？小晶整理了ELISA試劑盒數(shù)據(jù)處理相關(guān)知識，希望對您有幫助。
一、ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線分析步驟
1.標(biāo)曲和樣本孔的每個(gè)孔490nmOD值減去1230nm(或970nm)的OD值；
2.再將獲得的標(biāo)曲和樣本孔數(shù)據(jù)分別減去空白孔Blank的OD值；
3.以標(biāo)曲的濃度為橫坐標(biāo)，以這算出的OD值為縱坐標(biāo)，擬合標(biāo)曲(選擇R2值大于0.的比較好的擬合方式，必要時(shí)可以刪除個(gè)別差異較大的標(biāo)曲點(diǎn)進(jìn)行擬合)；
4.計(jì)算樣本值，將樣本減去空白孔的OD值復(fù)制，選軟件中的“粘貼”，得到的X值再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)就是終的濃度值。
二、ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合方程
1.直線回歸：直線回歸是基本、簡單的回歸分析方法，將所有的測試點(diǎn)擬合為一條直線，其擬合函數(shù)方程式為：y=a+bx。一般實(shí)際實(shí)驗(yàn)中線性的情況下直線回歸可以獲得較為理想的R2值，如果直線擬合不理想，可以考慮三次曲線、logistic曲線(四參數(shù))等。
2.logistic曲線(四參數(shù))擬合回歸方程：競爭法和夾心法都可以用到。它要求X值不能小于0(因?yàn)橹笖?shù)是實(shí)數(shù),故有此要求)。在很多情況下它都可以擬合ELISA試劑盒的反應(yīng)曲線,所以它也成了ELISA試劑盒試劑中應(yīng)用廣的模型之一。
注：曲線擬合方法雖多，要根據(jù)不同類型ELISA試劑盒本身的特點(diǎn)，選擇適合的曲線擬合模型，才能得到合理的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。一般情況下，需要綜合考慮標(biāo)準(zhǔn)曲線的趨勢走向以及R2值的大小以及樣本落值情況。
上海晶抗生物以誠信為本，努力打造ELISA試劑盒品牌，為您提供的售中、售前、售后服務(wù)，具有的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，把產(chǎn)品引入國內(nèi)市場，滿足國內(nèi)廣大客戶的需求，在二十一世紀(jì)生命科學(xué)蓬勃發(fā)展的時(shí)代，將緊跟生命科學(xué)的發(fā)展動態(tài)，為廣大科研學(xué)者探索生命的奧秘而奉獻(xiàn)綿薄之力！
上海晶抗生物工程有限公司
地址：上海市金山工業(yè)區(qū)亭衛(wèi)公路6558號9幢2441室
版權(quán)所有：上海晶抗生物工程有限公司 備案號：滬ICP備16026504號-5 總訪問量：695073 站點(diǎn)地圖 技術(shù)支持：智慧城市網(wǎng) 管理登陸
